技术简介
外泌体是细胞分泌的纳米级（30-150 nm）囊泡，携带蛋白质、核酸、脂质等生物活性分子，在细胞间通讯、疾病发生发展及生物标志物发现中发挥关键作用。然而，外泌体的研究高度依赖于提取纯度、鉴定准确性及批次间重现性。
我们建立了多技术联用的外泌体分离与表征平台，严格遵循国际细胞外囊泡学会（ISEV）发布的MISEV指南，确保每一份样本的制备质量满足下游多组学及功能研究需求。
技术原理
外泌体提取：外泌体的分离与鉴定基于其物理化学性质（密度、粒径、表面标志物）及生物活性。
标准鉴定流程：提取后样品需同时满足NTA粒径分布（主峰在30-150 nm） + TEM典型杯状形态 + WB阳性标志物三项指标，方可认定为合格外泌体。
技术方法
提取方法
超速离心
根据密度差异，通过不同离心力逐级去除细胞碎片、大囊泡，最终沉淀外泌体。金标准，适用于大体积样本。
尺寸排阻色谱（SEC）
利用多孔凝胶层析柱，根据分子大小分离外泌体，保留天然活性。适用于血浆、血清等复杂体液。
聚合物沉淀法
利用亲水性聚合物（如PEG）降低外泌体溶解度，低速离心沉淀。操作简便、通量高。
免疫亲和捕获
基于外泌体表面标志物（CD9、CD63、CD81、EpCAM等）的抗体或适配体进行特异性富集。
鉴定方法
NTA（纳米颗粒追踪分析）
激光散射追踪布朗运动，计算粒径分布及颗粒浓度。粒径范围30-150 nm，提供粒径分布图。
TEM（透射电镜）
负染色后观察外泌体杯状形态，确认囊泡结构完整性。形态学金标准，直观展示外泌体形态。
Western Blot
检测外泌体标志蛋白（CD9、CD63、CD81、TSG101、Alix）。验证外泌体身份，排除非外泌体囊泡污染。
技术路线
核心优势
高纯度
多方法联用（如SEC+超离）去除蛋白聚集体及脂蛋白污染，下游组学数据更可靠
高得率
优化提取流程，尤其针对珍贵临床样本（如脑脊液、少量血清）开发低起始量方案
严格质控
每批次提供NTA粒径曲线、TEM图像及WB条带图，结果可追溯
全流程服务
从样本接收、提取鉴定到组学检测，一站式完成
样本兼容广
细胞上清、血清、血浆、尿液、脑脊液、组织裂解液等
应用场景
| 研究领域 | 应用说明 |
|---|---|
| 液体活检与疾病标志物 | 从血清/尿液中分离外泌体，筛选miRNA/蛋白作为诊断或预后标志物 |
| 肿瘤微环境与免疫调控 | 分析肿瘤细胞外泌体对免疫细胞（如T细胞、巨噬细胞）的调控作用 |
| 神经科学与衰老 | 研究神经元或胶质细胞外泌体在阿尔茨海默病、帕金森病中的传播机制 |
| 药物递送与工程化外泌体 | 提取纯化后用于装载药物、靶向修饰及功能评价 |
| 干细胞与再生医学 | 分析间充质干细胞外泌体的修复功能，用于无细胞治疗研究 |
送样指南
| 样本类型 | 推荐起始量 | 最低起始量 | 保存条件 | 运输条件 |
|---|---|---|---|---|
| 细胞上清 | ≥50 mL | 20 mL | -80℃ | 干冰 |
| 血清/血浆 | ≥1 mL | 500 μL | -80℃ | 干冰 |
| 尿液 | ≥5 mL | 2 mL | -80℃ | 干冰 |
| 脑脊液 | ≥500 μL | 200 μL | -80℃ | 干冰 |
| 组织裂解液 | ≥200 mg | 100 mg | -80℃ | 干冰 |