技术简介

由蛋白质组学先驱 Ruedi Aebersold 教授开创的 DIA(数据非依赖性采集,又称 SWATH)技术,正推动蛋白质组学进入高通量、高重现性的新时代。该技术融合了传统"鸟枪法"的广度与质谱"金标准"SRM/MRM 的精准,将质谱全扫描范围分割为若干窗口,无遗漏、无差异地捕获样本中所有离子的碎片信息,实现全景式扫描与数据可回溯。

相比传统的 DDA(数据依赖性采集)方法,DIA 在定量重现性、检测深度和数据完整性方面具有显著优势,尤其适合大规模样本的精准定量分析。

DIA技术原理图

核心优势

1

鉴定数量

7735
个蛋白(疾病组)
DIA
7735
DDA
5067
2

定量覆盖率

98-99%
可定量蛋白比例
DIA
98-99%
DDA
95-96%
3

组内重复性

>0.98
组内相关系数(ICC)
DIA
>0.98
DDA
0.93-0.98
4

数据稳定性

<10%
组内变异系数(CV)
DIA
<10%
DDA
~15%

实验流程

DIA技术通过全景式窗口化采集与多策略智能解析,实现了蛋白质组学数据的高通量、高重现、高深度定量,助力您从复杂样本中挖掘可靠的生物学信息。

1

质谱数据采集

DIA Data Acquisition:采用全扫描与窗口化采集相结合的策略,确保无遗漏、高重现性地捕获样本中所有肽段的碎片信息。

2

数据解析

DIA Data Analysis:通过多种算法重建肽段碎片谱图,实现高置信度鉴定与定量。

实验流程图

研究案例

Rapid, deep and precise profiling of the plasma proteome with multi-nanoparticle protein corona

期刊:Nature Communications (2020) 影响因子:17.7 DOI:10.1038/s41467-020-17033-9

本文研究人员针对血浆蛋白质组高丰度蛋白掩盖低丰度信号的难题,开发了一种基于DIA定量蛋白组结合多纳米颗粒蛋白冠的深度覆盖技术。

通过差异化富集与96孔自动化流程,该方法在141例非小细胞肺癌样本中成功鉴定超2000种蛋白,将定量CV值控制在22%以内,实现了快速、精准且高通量的血浆蛋白谱分析,为大规模临床生物标志物发现提供了高转化价值的解决方案。

研究案例图

收样指南

🧫

细胞

≥ 10⁶-10⁷
🧬

组织

≥ 200mg
🩸

血清

≥ 100μL
💉

EDTA血浆

≥ 100μL