技术简介
RayBiotech 抗体芯片作为国际领先的高通量蛋白多因子检测技术,由全球蛋白质芯片专家团队研发,整合ELISA高特异性与微阵列高通量优势,为生命科学研究、临床生物标志物发现及药物开发提供高效、精准、可复用的核心解决方案。
技术原理
高通量抗体芯片是将数百至数千种特异性捕获抗体高密度固定于玻璃玻片或硝酸纤维素(NC)膜等固相载体上,形成有序微阵列;采用双抗体夹心法原理和荧光信号读取系统,实现了对单个样本中多达数百种蛋白的同步、高通量与精准定量分析。
核心优势
节省样本
仅需50-100μL液质样本即可检测几十到上千种蛋白
高特异性
基于抗原-抗体特异性结合的原理,确保检测准确性
高重复性
每个抗体点都经过严格的质控,确保实验可重复性
通量极高
可半定量检测8000种蛋白质,适合发现新标志物
样本适用广
适用于血清、血浆、细胞/组织裂解液及尿液、唾液、脑脊液、眼泪、痰液等特殊样本
应用场景
肿瘤研究
肿瘤差异蛋白筛选、肿瘤微环境解析、疾病分型与预后标志物挖掘
炎症免疫研究
细胞因子与趋化因子全景分析、自身免疫病、感染性炎症及免疫调控机制探索
药物研发与评价
候选药物药效评估、药物作用机制研究、毒理筛选与治疗靶点发掘
临床转化研究
大样本临床队列分析、疾病早期筛查、无创体液样本的蛋白组学表征
修饰与基础机制研究
蛋白糖基化、磷酸化等修饰谱检测,适配多组学联合分析与基础信号通路研究
研究案例
IL17A critically shapes the transcriptional program of fibroblasts in pancreatic cancer and switches on their protumorigenic functions
研究背景与挑战:胰腺导管腺癌(PDA)以高度纤维化、免疫抑制的肿瘤微环境(TME)著称,其中肿瘤相关成纤维细胞是TME中最丰富的基质细胞,但在肿瘤进展中的功能调控机制尚不明确。IL-17A作为一种在胰腺癌中高表达的炎症因子,其对CAFs的作用一直未被系统解析。传统方法只能检测少数几个细胞因子,难以全面揭示IL-17A对CAFs蛋白表达谱的全局影响。
高通量抗体芯片技术应用:研究团队利用RayBiotech高通量抗体芯片(AAM-CYT-2000)对小鼠原代胰腺成纤维细胞的分泌蛋白谱进行了系统性分析。实验设计:比较IL-17A基因正常与IL-17A基因敲除小鼠来源的CAFs的细胞因子、趋化因子等分泌蛋白表达差异。芯片规格:一次性检测超过144种细胞因子、趋化因子和生长因子,覆盖炎症、免疫调节、血管生成等多条通路。核心发现:芯片分析显示,IL-17A缺失后,CAFs的分泌谱发生根本性转变——促炎/免疫抑制因子(如IL-6、MCP-1)显著下调,而Th1型趋化因子(如CXCL9、CCL5)显著上调,提示CAFs从"促癌"表型向"抑癌"表型转化。
主要研究发现:IL-17A驱动CAFs促癌表型:芯片结果结合后续RNA-seq证实,IL-17A通过诱导CAFs分泌IL-6、MCP-1等因子,促进肿瘤细胞增殖、迁移和免疫逃逸。机制阐明:IL-17A缺失的CAFs转而分泌高水平的CXCL9、CCL5,有效招募并激活CD8⁺ T细胞,重塑免疫微环境。临床相关性:在胰腺癌患者组织芯片中,Tc17细胞的高丰度与患者更差的总生存率显著负相关,验证了靶向IL-17A信号通路的治疗潜力。
研究意义:本研究首次利用高通量抗体芯片系统绘制了IL-17A调控下CAFs的全局蛋白分泌图谱,揭示了IL-17A作为CAFs促癌表型的关键驱动因子,为胰腺癌的免疫治疗提供了新的靶点和策略。